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MALDI質譜其他技術應用

MALDI質譜其他技術應用

  • 分類:質譜成像技術
  • 作者:
  • 來源:
  • 發布時間:2021-02-25 10:00
  • 訪問量:

【概要描述】MALDI-TOF是一種軟電離技術,可用于檢測目標蛋白或多肽是否存在,有無二聚體存在,以及進行純度情況的大體評估。MALDI-TOF鑒定分子量范圍也非常廣,能夠鑒定700-1000000Da的蛋白分子量,準確度高達0.1%~0.01%,遠遠高于目前常規應用的SDS電泳與高效凝膠色譜技術。

MALDI質譜其他技術應用

【概要描述】MALDI-TOF是一種軟電離技術,可用于檢測目標蛋白或多肽是否存在,有無二聚體存在,以及進行純度情況的大體評估。MALDI-TOF鑒定分子量范圍也非常廣,能夠鑒定700-1000000Da的蛋白分子量,準確度高達0.1%~0.01%,遠遠高于目前常規應用的SDS電泳與高效凝膠色譜技術。

  • 分類:質譜成像技術
  • 作者:
  • 來源:
  • 發布時間:2021-02-25 10:00
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詳情

質譜技術的應用

1. 蛋白質純度分析以及分子量測定

MALDI-TOF是一種軟電離技術,可用于檢測目標蛋白或多肽是否存在,有無二聚體存在,以及進行純度情況的大體評估。MALDI-TOF鑒定分子量范圍也非常廣,能夠鑒定700-1000000Da的蛋白分子量,準確度高達0.1%~0.01%,遠遠高于目前常規應用的SDS電泳與高效凝膠色譜技術。

2. 蛋白指紋譜鑒定(PMF)

肽質量指紋譜(Peptide Mass Fingerprinting, PMF)是蛋白質被識別特異酶切位點的蛋白酶水解后得到的肽片段的質量圖譜。由于每種蛋白的氨基酸序列(一級結構)都不同,當蛋白被水解后,產生的肽片段序列也各不相同,因此其肽質量指紋圖也具有特征性。將肽譜圖與數據庫中蛋白質理論肽譜圖對比,從而鑒定蛋白質。因此,分子質量的精確度是PMF的關鍵指標所在,但蛋白質的翻譯后修飾可能使PMF的質量數與理論值不符,從而對蛋白鑒定的準確度有一定影響。

3. MS/MS串聯質譜法測序

串聯質譜法(MS/MS),是目前常用的質譜鑒定方式。MS/MS先通過一級質譜測定肽段質量,再選取豐度高的肽段進行二級質譜分析,在二級質譜中肽段相互碰撞導致氨基酸鍵斷裂,產生肽段碎片離子經由檢測器分析,從而得到篩選肽段的氨基酸序列信息。MS/MS利用豐富肽段碎片的精確質量信息,更具有特異性、可信度,極大地增加了數據庫檢索的可靠性。

 

 

 

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